修復(fù)DNA損傷部位需要什么酶(修復(fù)dna損傷部位需要什么酶)

1. 修復(fù)DNA損傷部位需要什么酶

DNA聚合酶的種類一共有五種，我認(rèn)為它的種類和各自功能如下：

第一種，DNA聚合酶α：功能：定位于胞核,參與復(fù)制引發(fā),不具5'－3'外切酶活性。

第二種，DNA聚合酶β：功能：定位于核內(nèi),參與修復(fù),不具5'－3'外切酶活性。

第三種，DNA聚合酶γ：功能：定位于線粒體,參與線粒體復(fù)制，不具5'－3'，有3'－5'外切活性）。

第四種，DNA聚合酶δ：功能：定位核，參與復(fù)制，具有3'－5',不具5'－3'外切活性。

第五種，DNA聚合酶ε：功能：定位于核，參與損傷修復(fù)，具有3'－5'，不具5'－3'外切活性。

希望我的回答對您有幫助。

2. 修復(fù)dna損傷部位需要什么酶

需要DNA解旋酶和DNA聚合酶，由于復(fù)制是是整條鏈完整的打開完整的合上，不要用的，DNA連接酶是生物工程時(shí)，從中間的磷酸二酯鍵將DNA切成兩段，要修補(bǔ)DNA才用的

3. dna修復(fù)過程中需要哪些酶

DNA聚合酶作用主要是復(fù)制DNA，并且起到修復(fù)DNA的作用。DNA聚合酶是人體重要的一種物質(zhì)，能夠與DNA合成起始于引物和DNA配對，配對的引物3'端帶有一個(gè)自由的羥基，隨后是在DNA聚合酶的催化下由這個(gè)自由羥基氧上的配對三磷酸堿基上的磷原子的親核取代，在戊糖和磷酸之間形成脂鍵從而完成一個(gè)堿基的延伸。

4. 在dna損傷修復(fù)中起作用的酶是

參與復(fù)制主要的酶和蛋白質(zhì)因子介紹如下：

(1)dna聚合酶：①原核細(xì)胞：以大腸桿菌為例，已發(fā)現(xiàn)dna聚合酶ⅰ，ⅱ和ⅲ，都是多功能酶，既有5'→3'聚合酶活性，又有3'→5'外切酶活性，dna聚合酶ⅰ還有5'→3'外切酶活性。dna聚合酶ⅰ的主要功能是修復(fù)dna的損傷，在復(fù)制中還能切除rna引物并填補(bǔ)留下的空隙。dna聚合酶ⅱ的作用是損傷修復(fù)。dna聚合酶ⅲ是dna的復(fù)制酶。新近研究發(fā)現(xiàn)的dna聚合酶ⅳ和ⅴ，它們涉及dna的錯(cuò)誤傾向修復(fù)。

②真核細(xì)胞：dna聚合酶α，β，γ，δ和ε，其中dna聚合酶α和δ真正具有合成新鏈的復(fù)制作用；β和ε參與dna的損傷修復(fù)，γ負(fù)責(zé)線粒體dna的復(fù)制。

(2)引物合成酶和引發(fā)體：引物合成酶又稱引發(fā)酶，催化rna引物的合成，該酶作用時(shí)需與另外的蛋白結(jié)合形成引發(fā)體才具有催化活性。

(3)dna連接酶：催化雙鏈dna一條鏈上切口處相鄰5'-磷酸基和3'-羥基生成磷酸二酯鍵的酶。連接酶作用的過程中，在原核細(xì)胞中以nad+提供能量，在真核細(xì)胞中以atp提供能量。

(4)dna解螺旋酶：催化：dna雙螺旋解鏈的酶。

(5)dna單鏈結(jié)合蛋白(ssb)：與dna分開的單鏈結(jié)合，起穩(wěn)定dna的單鏈、阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈不被核酸酶降解的作用。

(6)拓?fù)洚悩?gòu)酶ⅰ：消除dna的負(fù)超螺旋，改變dna的超螺旋數(shù)。

(7)拓?fù)洚悩?gòu)酶ⅱ：引入負(fù)超螺旋，消除復(fù)制叉前進(jìn)帶來的扭曲張力。

5. DNA切除修復(fù)需要的酶有

DNA聚合酶太多了撒 真核細(xì)胞有5種DNA聚合酶，分別為DNA聚合酶α（定位于胞核，參與復(fù)制引發(fā)具5'－3'外切酶活性），β（定位于核內(nèi)，參與修復(fù)，具5'－3'外切酶活性），γ（定位于線粒體，參與線粒體復(fù)制具5'－3'和3'－5'外切活性），δ（定位核，參與復(fù)制，具有3'－5'和5'－3'外切活性），ε（定位于核，參與損傷修復(fù)，具有3'－5'和5'－3'外切活性）。 原核細(xì)胞有3種DNA聚合酶，DNA-polIIIIII都與DNA鏈的延長有關(guān)。DNA聚合酶I是單鏈多肽，可催化單鏈或雙鏈DNA的延長；DNA聚合酶II則與低分子脫氧核苷酸鏈的延長有關(guān)；DNA聚合酶III在細(xì)胞中存在的數(shù)目不多，是促進(jìn)DNA鏈延長的主要酶。 純化的DNApolⅠ由一條多肽鏈組成，約含1000個(gè)氨基酸殘基，MW為109KD。分子含有一個(gè)二硫鍵和一個(gè)-SH基。通過二個(gè)酶分子上的-SH基與Hg2+結(jié)合產(chǎn)生二聚體，仍有活性。每個(gè)酶分子中含有一個(gè)Zn2+，在DNA聚合反應(yīng)起著很重要的作用。每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞中含有約400個(gè)分子，每個(gè)分子每分鐘在37℃下能催化667個(gè)核苷酸摻入正在生長的DNA鏈。經(jīng)過枯草桿菌蛋白酶處理后，酶分子分裂成兩個(gè)片段，大片段分子量為76KD，通常稱為Klenow片段，小片段的分子量為34KD。此酶的模板專一性和底物專一性均較差，它可以用人工合成的RNA作為模板，也可以用核苷酸為底物。在無模板和引物時(shí)還可以從頭合成同聚物或異聚物。 DNAPolⅠ在空間結(jié)構(gòu)上近似球體，直徑約65A。在酶的縱軸上有一個(gè)約20A的深溝(cleft)，帶有正電荷，這是該酶的活性中心位置，在此位置上至少有6個(gè)結(jié)合位點(diǎn):[1]模板DNA結(jié)合位點(diǎn);[2]DNA生長鏈或引物結(jié)合位點(diǎn);[3]引物末端結(jié)合位點(diǎn)，用以專一引物或DNA生長鏈的3'-OH;[4]脫氧核苷三磷酸結(jié)合位點(diǎn);[5]5'→3'外切酶活性位點(diǎn)，用以結(jié)合生長鏈前方的5'-端脫氧核苷酸并切除之;[6]3'→5'外切酶活性位點(diǎn)，用以結(jié)合和切除生長鏈上未配對的3'-端核苷酸。 DNApolⅡMW為120KD，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)約有100個(gè)酶分子，但活性只有DNApolⅠ的5%。該酶的催化特性如下： (1)聚合作用:該酶催化DNA的聚合，但是對模板有特殊的要求。該酶的最適模板是雙鏈DNA而中間有空隙(gap)的單鏈DNA部分，而且該單鏈空隙部分不長于100個(gè)核苷酸。對于較長的單鏈DNA模板區(qū)該酶的聚合活性很低。但是用單鏈結(jié)合蛋白(SSBP)可以提高其聚合速率，可達(dá)原來的50-100倍。 (2)該酶也具有3'→5'外切酶活性，但無5'→3'外切酶活性。 (3)該酶對作用底物的選擇性較強(qiáng)，一般只能將2-脫氧核苷酸摻入到DNA鏈中。 (4)該酶不是復(fù)制的主要聚合酶，因?yàn)榇嗣溉毕莸拇竽c桿菌突變株的DNA復(fù)制都正常。可能在DNA的損傷修復(fù)中該酶起到一定的作用。 DNApolⅢ全酶由多種亞基組成(見下表)，而且容易分解。盡管該酶在細(xì)胞內(nèi)存在的數(shù)量較少，但催化脫氧核苷酸摻入DNA鏈的速率分別是DNA聚合酶Ⅱ的15倍和30倍。該酶對模板的要求與DNA聚合酶Ⅱ相同，最適模板也是鏈DNA中間有空隙的單鏈DNA，單鏈結(jié)合蛋白可以提高該酶催化單鏈DNA模板的DNA聚合作用。DNApolⅢ也有3'→5'和5'→3'外切酶活性，但是3'→5'外切酶活性的最適底物是單鏈?zhǔn)荄NA，只產(chǎn)生5'-單核苷酸，不會產(chǎn)生二核苷酸，即每次只能從3'端開始切除一個(gè)核苷酸。5'→3'外切酶活性也要求有單鏈DNA為起始作用底物，但一旦開始后，便可作用于雙鏈區(qū)。DNA聚合酶Ⅲ是細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制所必需的酶，缺乏該酶的溫度突變株在限制溫度(nonpermissivetemperature)內(nèi)是不能生長的，此種突變株的裂解液也不能合DNA，但加入DNA聚合酶Ⅲ則可以恢復(fù)其合成DNA的能力。 T4-DNA聚合酶(T4-DNApol)：近年來在枯草桿菌，鼠傷寒沙門氏桿菌等細(xì)胞及噬菌體T4、T5、T7中分離到NDA聚合酶，這里只介紹T4DNA聚合酶。T4DNA聚合酶與大腸桿菌DNA聚合酶Ⅰ相似，也是一條多肽鏈，分子量亦相近，但氨基酸組成不同，它至少含有15個(gè)半胱氨酸殘基。但是，它在作用上與大腸桿菌DNApol不同;[1]它無5'→3'外切酶活性;[2]它需要一條有引物的單鏈DNA作模板。在有缺口的雙鏈DNA作模板時(shí)，需要有基因32蛋白的輔助(基因32蛋白在T4DNA復(fù)制中的作用和大腸桿菌單鏈結(jié)合蛋白的作用相似，基因32蛋白在復(fù)制叉處和單鏈DNA結(jié)合后可以促進(jìn)雙鏈的進(jìn)一步打開，并保持其單鏈狀態(tài)有利于新生鏈的合成);它利用單鏈DNA為模板進(jìn)，可同時(shí)利用它作為引物，即此單鏈DNA的3'端能環(huán)繞其本身的某一順序形成氫鍵配對，3'端的未雜交部分即被T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性切去，然后在其作用下從3'-OH端開始聚合，合成該模板DNA的互補(bǔ)鏈，再以互補(bǔ)鏈為模板合成原來的單鏈DNA。 TaqDNA聚合酶：由一種水生棲熱菌yT1株分離提取出，是發(fā)現(xiàn)的耐熱DNA聚合酶中活性最高的一種，達(dá)200,000單位/mg。具有5'-3'外切酶活性，但不具有3'-5'外切酶活性，因而在合成中對某些單核苷酸錯(cuò)配沒有校正功能。TaqDNA聚合酶還要具有非模板依賴性活性，可將PCR雙鏈產(chǎn)物的每一條鏈3'加入單核苷酸尾，故可使PCR產(chǎn)物具有3'突出的單A核苷酸尾；另一方面，在僅有dTTP存在時(shí)，它可將平端的質(zhì)粒的3'端加入單T核苷酸尾，產(chǎn)生3'端突出的單T核苷酸尾。應(yīng)用這一特性，可實(shí)現(xiàn)PCR產(chǎn)物的T-A克隆法。 TthDNA聚合酶：從ThermusthermophilusHB8中提取而得，改酶在高溫和MnCl2條件下，能有效地逆轉(zhuǎn)錄RNA；當(dāng)加入Mg2+后，該酶的聚合活性大大增加，從而使cDNA合成與擴(kuò)增可用一種酶催化。 還有很多生物公司因?yàn)樯�產(chǎn)需要自己研發(fā)的聚合酶，這就不再贅述了

6. 修復(fù)dna損傷部位需要什么酶活性

dna復(fù)制的引物是指在核苷酸聚合作用起始時(shí)，刺激合成的一種具有特定核苷酸序列的大分子，與反應(yīng)物以共價(jià)鍵形式連接，這樣的分子稱為引物。引物通常是人工合成的兩段寡核苷酸序列，一個(gè)引物與靶區(qū)域一端的一條DNA模板鏈互補(bǔ)，另一個(gè)引物與靶區(qū)域另一端的另一條DNA模板鏈互補(bǔ)。

所有的DNA復(fù)制都是從一個(gè)固定起點(diǎn)開始的，而且目前所知的DNA聚合酶都只能延長DNA鏈而不能從頭合成DNA鏈。DNA復(fù)制時(shí)，往往先由RNA聚合酶在DNA模板上合成一段RNA引物，再由DNA聚合酶從RNA引物3’末端開始合成新的DNA鏈。

7. dna修復(fù)需要dna連接酶

DNA即脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid),其基本組成單位是核苷酸，而核苷酸又是有核酸，戊糖和磷酸組成(DNA中的戊糖為脫氧核糖)。 DNA水解酶為一類可以將組成DNA分子的脫氧核糖核苷酸之間的連接(3’，5’-磷酸二酯鍵)打開的酶。 具體包括:DNA聚合酶α/引發(fā)酶(引發(fā)及后隨鏈的部分合成)，DNA聚合酶δ(DNA復(fù)制主要酶)，增殖細(xì)胞核抗原(滑動夾子，與合成連接性有關(guān))，拓?fù)洚悩?gòu)酶(母鏈DNA拓?fù)洚悩?gòu)化)，解(螺)旋酶(能解開DNA雙螺旋)，單鏈DNA結(jié)合蛋白及復(fù)制蛋白(單鏈DNA結(jié)合作用)，復(fù)制因子C(參與滑動夾子的裝配)，DNA連接酶(連接岡崎片段及參與修復(fù))，核酸酶(去除RNA引物)，側(cè)翼核酸內(nèi)切酶(去除RNA引物)。 總體作用是在DNA復(fù)制過程中發(fā)揮的，在DNA復(fù)制過程中起到關(guān)鍵性的作用。

8. dna聚合酶參與dna損傷修復(fù)

DNA聚合酶作用部位是磷酸二酯鍵。

1、聚合作用：在引物RNA-OH末端，以dNTP為底物，按模板DNA上的指令，即A與T，C與G的配對原則，逐步逐個(gè)、連續(xù)地將dNTP加到延伸中的DNA分子3'-OH末端，逐步合成延長中的子鏈DNA。這是DNA聚合酶的主要作用；

2、3’→5’'外切酶活性（校對作用）：這種酶活性的主要功能是從3’→5’方向識別和切除不配對的DNA生長鏈末端的核苷酸，3’→5’外切酶活性的主要功能是校對作用。當(dāng)加入的核苷酸與模板不互補(bǔ)而游離時(shí)則被3’→5’外切酶切除，以便重新在這個(gè)位置上聚合對應(yīng)的核苷酸，可見，3’→5’外切酶活性對DNA復(fù)制真實(shí)性的維持是十分重要的。以保證復(fù)制過程的保真性和準(zhǔn)確性；

3、5’→3’外切酶活性（切除修復(fù)作用）：該活性是從5’→3’方向水解DNA延長鏈前方的DNA鏈（即只對DNA上雙鏈處的磷酸二酯鍵有切割作用），主要產(chǎn)生5'—脫氧核苷酸。這種酶活性在DNA損傷的修復(fù)中可能起著重要作用。